Las mucinas son grandes glucoproteínas complejas que protegen las superficies de la mucosa intestinal al limitar el acceso de la materia ambiental a sus células epiteliales. Se han descrito varios genes de mucina, incluido MUC3, que es una mucina asociada a la membrana del intestino delgado. El aumento de la transcripción de ARNm de MUC3 se induce por incubación de células epiteliales intestinales con una cepa de Lactobacillus que se sabe que se adhiere a ellas.
OBJETIVOS:
Para determinar si el aumento de la expresión de la mucina MUC3 de las células epiteliales en respuesta a las cepas de Lactobacillus produce una mayor secreción extracelular de las mucinas MUC3 y la importancia de la adherencia de las células epiteliales en la modulación de la expresión de la mucina MUC3.
MÉTODOS
Las células HT29 cultivadas para mejorar la expresión de mucinas MUC3 se incubaron con cepas de Lactobacillus seleccionadas. El medio de cultivo celular gastado se recogió para la detección de mucinas MUC3 secretadas usando inmunoensayo dot blot con un anticuerpo MUC3 generado. Después de la incubación, se recogió ARN de células HT29 para el análisis de la expresión de MUC3 mediante análisis de transferencia Northern usando una sonda de ADNc de MUC3. Los estudios de unión in vitro utilizando cepas de Lactobacillus incubadas solas o coincubadas con cepa de Escherichia coli enteropatógena E2348 / 69 se usaron para estudios de adherencia e inhibición de la adherencia, respectivamente.
RESULTADOS
Las cepas de Lactobacillus con una capacidad mínima para adherirse a las células HT29 no lograron inducir la regulación positiva de la expresión del gen de mucina. Hubo una correlación directa entre la regulación positiva de la expresión de ARNm de mucina MUC3 y la secreción extracelular de mucina MUC3. Las mismas cepas de Lactobacillus que aumentaron la secreción extracelular de la mucina MUC3 condujeron a una disminución de la adherencia del enteropatógeno E coli E2348 / 69 durante los experimentos de coincubación.
CONCLUSIÓN:
Los microbios probióticos inducen la transcripción y traducción de la mucina MUC3 con secreción extracelular de las mucinas MUC3. La adherencia de las células epiteliales aumenta los efectos de los probióticos en la expresión de la mucina eucariota.